荧光光谱与激发光谱的关系激光诱导荧光产生的原理由荧光的发光原理可知,分子荧光光谱与激发光源的波长无关,只与荧光物质本身的能级结构有关。何谓荧光的激发光谱和发射光谱?它们之间有什么关系?发射光谱是物质被某种激发光激发后的发光光谱；激发光谱是物质以发射谱中某个波长点（一般取峰值）作为监控波长，扫描激发的波长。一般光致发光的物质，都会用激发、发射光谱表征其特性。激发波长一般都会小于发射波长，是因为物质在吸收激发光的能量被激发产生荧光的同时还会伴随着有内部的能量损失，并以其它形式释放出来；按照能量守恒，荧光的能量一定少于激发光的能量，而在波长上的表现就是荧光发射波长要大于激发波长。荧光发射光谱和激发光谱的关系答：激发光谱和发射光谱是荧光光谱中的两种，激发光谱是荧光物质在不同波长激发光源的激发下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况，也就是不同波长的激发光的相对效率；发射光谱则是某一固定波长的激发光源激发作用下荧光强度在不同波长处的分布情况，也就是荧光中不同波长的光成分的相对强度。荧光激发光谱：让不同波长的激发光源激发荧光物质使之发生荧光，而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上，然后以激发光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标所绘制的图，即为荧光激发光谱。荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关 。荧光发射光谱：使激发光的波长和强度保持不变，而让荧光物质所发出的荧光通过发射单色器照射于检测器上，亦即进行扫描，以荧光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标作图，即为荧光光谱，又称荧光发射光谱。荧光光谱与激发光谱的关系是荧光光谱包括吸收波长和发射波长两种。激发波长是荧光物质在不同波长的激发光作用下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况，也就是不同波长的激发光的相对效率；从而可以根据不同波长产生吸收光谱。发射波长则是某一固定波长的激发光作用下荧光强度在不同波长处的分布情况，也就是荧光中不同波长的光成分的相对强度，从而检测荧光物质在不同波长的激发光作用下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况。激发光谱与荧光光谱的区别与特点原子外层电子吸收光子后，由基态跃迁到激发态，再回到较低能级或者基态时，发射出一定波长的辐射，称为荧光。 （1）激发光谱 是指发光的某一谱线或谱带的强度随激发光波长（或频率）变化的曲线。横坐标为激发光波长，纵坐标为发光相对强度。 激发光谱反映不同波长的光激发材料产生发光的效果。即表示发光的某一谱线或谱带可以被什么波长的光激发、激发的本领是高还是低；也表示用不同波长的光激发材料时，使材料发出某一波长光的效率。荧光为光致发光，合适的激发光波长需根据激发光谱确定。激发光谱是在固定荧光波长下，测量荧光体的荧光强度随激发波长变化的光谱。 （2）发射光谱 是指发光的能量按波长或频率的分布。通常实验测量的是发光的相对能量。发射光谱中，横坐标为波长，纵坐标为发光相对强度。 （3）荧光强度与荧光物质浓度的关系 用强度为I0的入射光，照射到液池内的荧光物质时，产生荧光，荧光强度If用仪器测得，在荧光浓度很稀（A《0。05）时，荧光物质发射的荧光强度If与浓度有下面的关系：If=KC。 测试： 从150W氙灯光源发出的紫外和可见光经过激发单色器分光后，再经分束器 照到样品表面，样品受到该激发光照射后发出的荧光经发射单色器分光，再经荧光端光电倍增管倍增后由探测器接收。另有一个光电倍增管位于监测端，用以倍增激发单色器分出的经分束后的激发光。 光源发出的紫外-可见光经过激发单色器分光后，照到荧光池中的被测样品上，样品受到该激发光照射后 发出的荧光经发射单色器分光，由光电倍增管转换成 相应电信号，再经放大器放大反馈进入A/D转换单元，将模拟电信号转换成相应数字信号，并通过显示器或打印机显示和记录被测样品谱图。荧光物质的激发光谱和吸收光谱有何关系荧光属于光致发光，需选择合适的激发光波长(Ex)以利于检测。激发波长可通过荧光化合物的激发光谱来确定。激发光谱的具体检测办法是通过扫描激发单色器，使不同波长的入射光激发荧光化合物，产生的荧光通过固定波长的发射单色器，由光检测元件检测。最终得到荧光强度对激发波长的关系曲线就是激发光谱。在激发光谱曲线的最大波长处，处于激发态的分子数目最多，即所吸收的光能量也最多，能产生最强的荧光。当考虑灵敏度时，测定应选择最大激发波长。荧光激发波长对应于某一个紫外可见光谱吸收波长，可能稍大一些，不完全相等。你可以将紫外吸收波长设为激发波长，扫描发射光谱，然后再固定发射波长扫描激发光谱，得到最大激发波长，再做发射光谱，再做激发光谱，一直到得到固定不变的激发和发射波长为止。紫外吸收波长可以作为激发波长,激发波长的选择不影响发射波长的选择,理论上激发光谱和发射光谱有一个镜像关系,很多人就误以为,激发波长和发射波长时一一对应的,其实不然,激发光谱的强弱只代表该物质在所选择的激发波长下被激发的比率,其发射光谱还是原来形状的光谱,只是在强弱上改变。我们选择最大激发波长是为了获得高激发率的物质形态,间接提高灵敏度,选择最大发射波长是为了直接提高灵敏度
